Содержание
Высокоэффективная жидкостная хроматография - это метод лабораторного анализа смеси. Это эффективный тип хроматографии, который использует высокое давление, а не просто гравитацию, чтобы пропустить образец смеси через колонку. Образец впрыскивается, затем насос, содержащий большое количество давления, помогает перемещать образец вдоль насадочной колонны, где он разделяется на отдельные компоненты. Это разделение затем анализируется детектором для получения результатов.
Инъекционный сайт
Чтобы впрыснуть в ВЭЖХ, образец сначала должен быть растворен в полярном жидком растворителе, предпочтительно с известным спектром ВЭЖХ, чтобы его данные можно было отличить от образцов. Жидкий раствор, содержащий образец, помещается в прибор и направляется в колонку. Фактическое местоположение места инъекции зависит от марки инструментов. В большинстве случаев процесс инъекции автоматизирован, но в некоторых случаях работник лаборатории должен вводить образец с помощью маленькой иглы шприца.
Компонент насоса
Компонент насоса блока ВЭЖХ необходим, потому что он обеспечивает давление, которое продвигает образец через колонку. Мощность насоса меняется, но мощный может создавать давление до 6000 фунтов на квадратный дюйм, или фунтов на квадратный дюйм, которое применяется после введения образца. Это позволяет образцу проходить через колонку быстрее и эффективнее, чем если бы он капал, используя только силу тяжести.
Описание столбца
Увеличенная скорость образца, прошедшего через колонку с помощью насоса, позволяет использовать колонку другого типа, чем те, которые используются в простой жидкостной хроматографии. Упаковочный материал в колонне может иметь гораздо меньший размер частиц, что увеличивает площадь поверхности и, следовательно, способствует взаимодействию образца с колонкой. Большинство колонок ВЭЖХ работают через полярность. Образец растворяют в полярном растворителе, а колонка состоит в основном из неполярных углеводородов. Полярные части молекулы пробы проходят через колонку очень быстро, поскольку они в основном взаимодействуют с растворителем, тогда как неполярные компоненты пробы задерживаются в колонке, образуя слабые взаимодействия с компонентами колонки. Поэтому компоненты образцов выходят из колонки в порядке от наиболее полярного до наиболее неполярного.
Функция детектора
Детекторы также различаются в зависимости от типа используемого прибора ВЭЖХ. Тем не менее, большинство из них работают одинаково. Источник ультрафиолетового света светит на отдельные компоненты образца, когда они выходят из колонки. Большинство органических соединений поглощают определенное количество света, поэтому, проходя мимо приложенного светового луча, детектор может определить, сколько света поглощено. Детектор также записывает время удерживания компонентов в зависимости от порядка, в котором они выходят из колонки. Этот результат затем может быть проанализирован на основе площади пика, чтобы определить точную природу компонентов образцов.