Содержание
- Лучшая визуализация
- Идентификация и классификация
- Обнаружение жизнеспособности
- Идентификация клеточных структур
Микробиологи изучают характеристики микроорганизмов, таких как водоросли, простейшие, бактерии, грибки и вирусы, с помощью микроскопа. В то время как некоторые организмы, такие как простейшие и дрожжевые клетки, легко наблюдать с помощью влажного крепления, бактериальные клетки требуют окрашивания. Ученые разработали несколько методов, таких как окрашивание по Граму, кислотно-быстрое окрашивание и флуоресцентное окрашивание для лучшей визуализации бактериальных клеток и клеточных структур. Используя такие методы окрашивания, можно определить структурные особенности, которые помогают классифицировать бактерии.
Лучшая визуализация
Бактериальные организмы настолько малы, что большинство из них видны только под микроскопом с увеличением в 1000 раз. Однако простое увеличение размера не обеспечивает достаточной степени ясности, поэтому бактерии должны быть окрашены перед наблюдением, чтобы обеспечить ясность, необходимую для визуализации.
Идентификация и классификация
Окрашивание бактерий для различения типов бактерий известно как дифференциальное окрашивание. Окрашивание по Граму является одним из таких дифференциальных окрашиваний, которые различают бактерии на основе содержания их клеточной стенки. В этом методе бактериальные клетки реагируют с кристаллическим фиолетовым пятном, чтобы принять фиолетовый цвет. При добавлении средства для окрашивания некоторые бактериальные клетки теряют цвет, а другие - нет. При добавлении окраски сафранина обесцвеченные клетки приобретают окраску, чтобы выглядеть красной, в то время как бактериальные клетки, которые не теряют цвет, остаются фиолетовыми. Бактериальные клетки, которые приобретают красный цвет, называются грамотрицательными организмами, а те, которые не принимают цвет, классифицируются как грамположительные организмы. Окрашивание по Граму обеспечивает быстрый метод для первоначальной идентификации бактерий, вовлеченных в инфекции. Точно так же процедура кислотного окрашивания помогает специфически идентифицировать организмы, принадлежащие к классу бактерий, называемых микобактериями, такими как Mycobacterium tuberculosis.
Обнаружение жизнеспособности
В образцах бактериальных культур часто важно обнаруживать присутствие живых бактериальных клеток. Методы окрашивания, такие как флуоресцентное окрашивание, помогают определить, являются ли культуральные клетки жизнеспособными или нет. Живые бактерии обладают способностью превращать пятно 5-циано-2,3-дитолилхлорид тетразолия (ХТК) в краситель, который демонстрирует красную флуоресценцию. Поэтому, когда культуры, окрашенные CTC, излучают такую флуоресценцию, это указывает на присутствие жизнеспособных бактерий. Пропидий йодид - это пятно, которое действует только на неживые клетки, которые имеют поврежденные мембраны, и, следовательно, полезно для выявления мертвых бактериальных клеток.
Идентификация клеточных структур
Окрашивание обеспечивает метод четкой визуализации нескольких клеточных структур. Например, метод окрашивания Fuelgen позволяет идентифицировать ядро в бактериальных клетках, тогда как окрашивание Альберта полезно для визуализации метахроматических гранул. Точно так же метод пропитки серебром позволяет идентифицировать спирохеты. Жгутики легко наблюдать, если они окрашены пятном Рю. Окрашивание малахитовой зеленью помогает выявить бактериальные споры.