Агар - это желеобразное вещество, полученное из очищенных клеточных стенок красных водорослей.Он добавляется в микробиологические среды, которые представляют собой материалы, на которых выращиваются микроорганизмы в лабораториях, чтобы придать веществу более твердую структуру. Агар не имеет питательной ценности, поэтому, когда ученые используют его для культивирования микроорганизмов, они добавляют различные питательные вещества для увеличения роста бактерий в чашках Петри или пробирках. Когда исследователи хранят бактерии в пробирке, это называется скошением агара, поскольку жидкая среда для роста затвердевает, когда пробирка находится в наклонном положении. Верхняя крышка с завинчивающейся крышкой предотвращает высыхание агара.
Среда готовится по-разному для наклонных чашек, чем чашки Петри. Стерилизация проводится с помощью агара в пробирках; Чашки Петри предварительно стерилизуют перед тем, как в них налить стерилизованный агар. Измерьте количество необходимой воды и поместите ее в колбу Эрленмейера. Нагрейте это на печи, пока это почти не кипит. При необходимости добавьте другие ингредиенты и помешивайте смесь медленно и постоянно, пока они не растворится. Эти ингредиенты могут включать говяжий экстракт, пептон и рН-буферы в зависимости от типа микроорганизма, культивируемого.
Перед добавлением порошка обезвоженного агара смешайте его с небольшим количеством холодной дистиллированной воды, чтобы предотвратить образование комков. Будьте осторожны при добавлении агара в горячую жидкость, поскольку он может пениться и переполнить кастрюлю. Добавляйте небольшое количество агара за один раз и перемешивайте, чтобы равномерно распределить агар. Выключите огонь, когда смесь начнет парить, прежде чем она закипит.
Поместите пробирки без крышки на штатив для пробирок. Заполните пробирки путем передачи около 5 миллилитров - около 0,17 унции или 1 чайная ложка - расплавленного агара из горшка с использованием стерильной пипетки. Свободно закройте каждую пробирку, потому что агар не будет стерилизован, если они плотно закрыты. Стерилизовать все пробирки в автоклаве в течение примерно 25 минут при температуре 121 градус Цельсия или 250 градусах Фаренгейта.
Когда агар еще горячий, осторожно наклоните штатив, удерживая пробирки на твердой поверхности, или толстую книгу, убедившись, что среда внутри пробирок находится в наклонном положении относительно пробирок. Дайте среде остыть и затвердеть под этим углом, что увеличивает площадь поверхности агара. Затяните крышки пробирок после охлаждения агара. Сланцы готовы к использованию, как только агар затвердеет. Их можно хранить при комнатной температуре или в холодильнике для дальнейшего использования.
Инокулировать уклон путем переноса клеток с помощью инокуляционной петли из микроорганизма, содержащего одну колонию, на чашку к поверхности уклона. Переместите петлю по поверхности уклона и перепишите трубки. Инкубируйте уклон до появления признаков роста, затем поместите пробирку в холодильник.