Содержание
Escherichia coli, E.coli, является бактерией, которая растет в нижних отделах кишечника млекопитающих. Эта бактерия была впервые обнаружена в конце 1800-х годов. С тех пор он имеет долгую историю использования в научных исследованиях. Это наиболее широко используемый организм в молекулярной генетике. Одна из причин, почему кишечная палочка обычно используется в научных исследованиях, заключается в том, что ее легко выращивать в лаборатории. Факторами, облегчающими рост кишечной палочки, являются ее простые потребности в питании, высокие темпы роста и умеренные потребности в уходе.
Стерилизовать инокуляционную петлю, поместив ее в пламя горелки Бунзена. Пропустите нижнюю половину петли через пламя, пока оно не станет красным.
Дайте петле остыть. Вы можете прикоснуться к стерильному агару на тарелке, чтобы убедиться, что он остыл. Не ставьте петлю на стол и не позволяйте ей соприкасаться ни с чем, кроме стерильного агара или желаемой культуры, после того, как она была стерилизована.
Опустите петлю в культуру кишечной палочки и затем удалите ее.
Откройте чашку с агаром и осторожно проведите петлей взад и вперед по поверхности одного участка агара. Будьте осторожны, чтобы не поцарапать агар петлей. Агар обеспечивает питательные вещества, необходимые для роста кишечной палочки.
Поместите петлю в пламя горелки Бунзена снова, чтобы стерилизовать его. Как только стержень петли остынет, прикоснитесь к нему к стерильной части пластины, чтобы убедиться, что он остыл, затем проведите петлю по вашей первой полосе, чтобы сделать вторую полосу. Эта вторая серия является разбавленной версией первой серии. Повторите этот процесс стерилизации и скольжения, пока несколько частей агара пластины не скользят. Причина, по которой вы это делаете, заключается в том, что вы можете позже выбрать одну из клональных колоний. Это поможет убедиться, что у вас есть хотя бы один участок с отдельными колониями - не слишком концентрированный (который будет иметь слишком большой рост и не позволит вам выбирать из одной колонии) и не слишком разбавленный (что не даст колоний) ,
Стерилизуйте петлю в пламени в последний раз, прежде чем отложить ее в рабочую зону.
Положите крышку обратно на пластину с агаром. Переверните тарелку вверх дном и поместите ее в инкубатор, настроенный на 37 градусов по Цельсию (98,6 градусов по Фаренгейту). Эта идеальная температура инкубации имитирует температуру человеческого тела, в которой находится кишечная палочка. В течение 24-48 часов на чашке с агаром появятся видимые колонии бактерий E.coli.